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酸性蛋白酶試劑盒操作步驟

瀏覽次數(shù):745發(fā)布日期:2021-08-26

酸性蛋白酶試劑盒操作步驟:

1. 標(biāo)準(zhǔn)品的稀釋與加樣:在酶標(biāo)包被板上設(shè)標(biāo)準(zhǔn)品孔10孔,在di一、第二孔中分別加標(biāo)準(zhǔn)品100μl,然后在di一、第二孔中加標(biāo)準(zhǔn)品稀釋液50μl,混勻;然后從di一孔、第二孔中各取100μl分別加到第三孔和第四孔,再在第三、第四孔分別加標(biāo)準(zhǔn)品稀釋液50μl,混勻;然后在第三孔和第四孔中先各取50μl棄掉,再各取50μl分別加到第五、第六孔中,再在第五、第六孔中分別加標(biāo)準(zhǔn)品稀釋液50ul,混勻;混勻后從第五、第六孔中各取50μl分別加到第七、第八孔中,再在第七、第八孔中分別加標(biāo)準(zhǔn)品稀釋液50μl,混勻后從第七、第八孔中分別取50μl加到第九、第十孔中,再在第九第十孔分別加標(biāo)準(zhǔn)品稀釋液50μl,混勻后從第九第十孔中各取50μl棄掉。(稀釋后各孔加樣量都為50μl,濃度分別為180 ng/L,120 ng/L ,60 ng/L,30 ng/,15 ng/L)。

2. 加樣:分別設(shè)空白孔(空白對(duì)照孔不加樣品及酶標(biāo)試劑,其余各步操作相同)、待測(cè)樣品孔。在酶標(biāo)包被板上待測(cè)樣品孔中先加樣品稀釋液40μl,然后再加待測(cè)樣品10μl(樣品最終稀釋度為5倍)。加樣將樣品加于酶標(biāo)板孔底部,盡量不觸及孔壁,輕輕晃動(dòng)混勻。

3. 溫育:用封板膜封板后置37℃溫育30分鐘。

4. 配液:將30(48T的20倍)倍濃縮洗滌液用蒸餾水30(48T的20倍)倍稀釋后備用。

5. 洗滌:小心揭掉封板膜,棄去液體,甩干,每孔加滿洗滌液,靜置30秒后棄去,如此重復(fù)5次,拍干。

6. 加酶:每孔加入酶標(biāo)試劑50μl,空白孔除外。

7. 溫育:操作同3。

8. 洗滌:操作同5。

9. 顯色:每孔先加入顯色劑A50μl,再加入顯色劑B50μl,輕輕震蕩混勻,37℃避光顯色15分鐘.

10. 終止:每孔加終止液50μl,終止反應(yīng)(此時(shí)藍(lán)色立轉(zhuǎn)黃色)。

11. 測(cè)定:以空白空調(diào)零,450nm波長(zhǎng)依序測(cè)量各孔的吸光度(OD值)。 測(cè)定應(yīng)在加終止液后15分鐘。

Ephrin A2抗體

大腸埃希菌菌體蛋白抗體

雌激素硫酸轉(zhuǎn)移酶抗體

E Tag標(biāo)簽抗體

登革熱病毒包膜糖蛋白E抗體

食道癌相關(guān)基因抗體

EB病毒核抗原抗體-3A抗體

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轉(zhuǎn)錄因子E2F-1抗體

內(nèi)皮素轉(zhuǎn)化酶1抗體

細(xì)胞外基質(zhì)蛋白1抗體

外胚層發(fā)育不良抗體

E2 tag標(biāo)簽抗體

鐵螯合酶抗體

DH5α大腸桿菌菌體蛋白抗體

磷酸化絲裂原活化蛋白激酶1/2抗體

上皮細(xì)胞粘附分子抗體

酪氨酸蛋白激酶受體B2抗體

表皮生長(zhǎng)因子抗體

表皮生長(zhǎng)因子受體3抗體

酪氨酸蛋白激酶A4受體抗體

上皮鈣粘附分子抗體

紅細(xì)胞生成素受體抗體

腦啡肽抗體

EID2蛋白抗體

上皮細(xì)胞粘附分子抗體

紅細(xì)胞膜相關(guān)蛋白ERMAP抗體


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